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干粉培养基的规范使用方法分享

更新时间：2025-11-24

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　　在微生物检测、临床诊断、食品卫生及科研实验中，干粉培养基以其成分稳定、便于储存、配制灵活等优势，成为实验室的常规耗材。然而，其使用看似简单，实则对称量、溶解、灭菌、pH调节等环节均有严格要求。操作不当轻则导致菌落不长、形态异常，重则引发假阴性/假阳性结果，影响检测结论。掌握干粉培养基的规范使用方法，是保障微生物实验可靠性的基石。

　　第一步：核对信息与储存管理

　　使用前仔细核对培养基名称、批号、有效期及适用标准（如GB、ISO、USP）。干粉应储存在阴凉、干燥、避光环境中（建议10-25℃，湿度＜60%），开封后需密封并置于干燥器中，6个月内用完。若出现结块、变色或异味，应立即停用。

　　第二步：精准称量与水质选择

　　按说明书要求准确称量（电子天平精度0.01g），避免多加或少加影响营养浓度与渗透压。必须使用去离子水或蒸馏水（电导率≤5μS/cm），严禁使用自来水，以防氯、钙、镁离子干扰微生物生长或形成沉淀。

　　第三步：充分溶解与初步调pH

　　将干粉缓慢加入水中，边加边搅拌，避免结团。加热助溶（如煮沸1-2分钟）可加速溶解，但含糖或热敏成分（如抗生素、血清）的培养基需冷却后再添加。溶解后用经校准的pH计测量，按说明书用1MNaOH或HCl微调至规定pH（通常±0.2范围内）。

　　第四步：分装与灭菌控制

　　分装至洁净容器（如试管、三角瓶），液体培养基留1/4空间，固体培养基（加1.5-2.0%琼脂）需摇匀防沉淀。严格按推荐条件灭菌：多数培养基采用121℃、15psi、15分钟高压蒸汽灭菌。含糖培养基建议115℃灭菌20分钟，防止焦化；热不稳定成分需过滤除菌后无菌加入。

　　第五步：无菌检验与性能验证

　　灭菌后随机抽取样品37℃培养24-48小时，确认无菌生长。使用新批次时，应进行适用性检查：接种标准菌株（如大肠杆菌ATCC25922、金葡菌ATCC6538），验证生长率、菌落形态及选择性/指示性功能是否符合要求。

　　第六步：规范储存与使用

　　配制好的平板倒置存放于4℃冰箱，1-2周内用完（含抗生素者≤7天）；液体培养基冷藏可存4周。使用前回温至室温，避免冷凝水稀释表面。已接种培养基不得再次使用。