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切记！正确安装无菌微孔滤膜直接关系到无菌操作的成功与否

更新时间：2025-10-13

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　　在细胞培养、制药生产、生物制剂过滤、无菌检验与高纯试剂制备中，无菌微孔滤膜通过0.22μm或0.45μm的精密孔径，高效截留细菌、微粒与杂质，确保液体的无菌状态。正确安装无菌微孔滤膜，是确保其完整、密封的关键，直接关系到无菌操作的成功与否。

　　一、安装前准备

　　环境与工具：

　　在超净台或生物安全柜内操作，开启紫外灭菌30分钟，再通风15分钟；

　　操作者穿戴无菌手套、口罩与实验服，避免手部污染。

　　器材检查：

　　确认滤器（滤杯、滤膜支架、底座）已高温高压灭菌（121℃,20min）并冷却；

　　检查滤膜包装是否完好，生产日期是否在有效期内；

　　核对滤膜材质（如PVDF、PES、尼龙）与孔径（0.22μm）是否符合样品要求。

　　二、滤膜取出

　　关键原则：严禁用手或非无菌工具直接接触滤膜表面！

　　正确操作：

　　用无菌镊子（火焰灭菌后冷却）轻轻撕开滤膜外包装；

　　夹取滤膜边缘，将其平稳放置于滤器底座的支撑网上；

　　确保滤膜展开、无褶皱、无破损，且覆盖支撑网孔。

　　三、滤器组装

　　顺序与方向：

　　将滤膜光滑面朝上（即液体流入面），粗糙面朝下与支撑网接触；

　　将滤杯（上部）对准底座，垂直向下缓慢旋紧或卡紧。

　　力度控制：

　　用手均匀施力拧紧，切勿使用扳手等工具强行紧固，防止滤膜变形、破裂或底座螺纹损坏；

　　确保滤杯与底座结合处无缝隙，形成气密性连接。

　　四、气密性测试

　　正压测试法（推荐）：

　　将滤器出口连接真空泵或氮气源（压力≤0.1MPa）；

　　关闭入口，向滤器内通入低压气体；

　　在接口处涂抹无菌水或肥皂水，观察30秒；

　　若无气泡产生，表明密封良好；若有气泡，需重新组装。

　　负压测试法：

　　连接真空泵，抽真空至-0.08MPa，关闭阀门，观察压力是否在5分钟内保持稳定。

　　五、过滤操作

　　确认气密性合格后，将待过滤液体倒入滤杯；

　　连接真空泵（负压过滤）或加压源（正压过滤），开始过滤；

　　过滤过程中观察滤膜是否破裂（液体浑浊或流速异常加快）。

　　六、使用后处理

　　过滤完成后，先释放压力，再小心拆卸滤器；

　　用镊子取出滤膜，按生物危害废物处理；