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简述干粉培养基使用过程中的常见问题相应解决方法

更新时间:2025-11-05点击次数:91
   干粉培养基是微生物实验的基石,广泛应用于食品检测、临床诊断、药品无菌检查等领域。然而,在实际使用中,常因操作疏忽、环境偏差或储存不当,导致培养失败、结果异常甚至误判,这些问题悄然影响实验可靠性。识别并科学应对干粉培养基的这些问题,是保障微生物检测准确性的关键。

 


  问题一:培养基不凝固或凝胶强度弱
  原因:琼脂量不足、灭菌时间过长导致降解、水质硬度过高(钙镁离子干扰凝胶形成)。
  对策:严格按说明书称量琼脂(通常15-20g/L);避免反复高压灭菌;使用去离子水或蒸馏水配制。若已配制,可补加1-2%琼脂重新灭菌(仅限未接种前)。
  问题二:培养基颜色异常(如变黄、变褐)
  原因:灭菌温度过高或时间过长导致糖类焦化;干粉受潮氧化;pH调节不当。
  对策:含糖培养基采用115℃、20分钟灭菌;检查干粉是否结块变色,过期勿用;灭菌前精确调pH至标准范围(如营养琼脂pH7.2±0.2)。
  问题三:目标菌不生长或生长微弱
  原因:培养基成分失效(如抗生素降解)、灭菌过度破坏营养、接种量不足或菌种活性差。
  对策:新批次培养基必须做适用性检查(接种标准菌株验证生长);避免反复冻融或长期高温存放干粉;确保接种物处于对数生长期。
  问题四:非目标菌大量生长(选择性失效)
  原因:选择性抑制剂(如胆盐、抗生素)添加量不足、灭菌破坏或pH偏离。
  对策:严格按配方添加抑制剂;热敏成分采用过滤除菌后无菌加入;验证培养基对非目标菌的抑制率(如SS琼脂应抑制大肠杆菌)。
  问题五:平板表面大量冷凝水
  原因:灭菌后未及时摇匀冷却、倒平板后未充分干燥、冰箱储存时温差大。
  对策:灭菌后稍冷却(约50℃)再倒平板;倒置平板于超净台中吹干30分钟;冷藏前用封口膜密封,回温后再打开。

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